产品对于鸡肉,猪肉,鸭子

LSY-10052 Amantadine ELISA测试套件

AmantadineELISA Test Kit

Catalog No. LSY-10052

1. Principle

该测试试剂盒基于竞争性酶免疫测定用于检测氨腺嘌呤。 偶联抗原在微阱条上预涂覆。 amantadine. 在样品和预涂层上的偶联抗原,用于抗议 Amantadine 抗体。在加入酶缀合物后,加入TMB底物用于着色。样品的光密度(OD)值与甘露出氨基具有负相关性 在样品中。将该值与标准曲线和amantadine进行比较 residues 随后获得。


2.  技术规格

Sensitivity: 0.2ppb

培养箱温度: 25℃

Incubator time:  30min~15min

Detection limit:

鸡肉,鸭子............................................. ............. ..........................................0.2ppb

交叉反应速率:

Amantadine 100%

Recovery rate:

鸡,鸭............................................. ......................... ..................... ...... 90±25%


3. Components

1

微井条

12条带有8个可拆卸孔的条带

2

6×标准溶液(每个1毫升)

0ppb

0.2ppb

0.8ppb

3.2ppb

12.8ppb

51.2ppb

3

酶共轭

7ml

red cap

4

抗体工作解决方案

7ml

blue cap

5

Substrate A

7ml

white cap

6

SubstrateB

7ml

black cap

7

Stop solution

7ml

yellow cap

8

Extractant

50ml*2

透明盖帽

9

20×浓缩洗涤缓冲液

15ml

white cap

10

5× 集中重新溶解的解决方案

10ml

white cap


4. 需要材料但未提供

1)  Equipment: ELISA Reader (450 nm / 630nm),均化器,振动器,离心机,平衡:0.01g数量敏感,氮气干燥装置,培养箱,渐进式移液器,打印机

2)  MicroPipettes:单通道20ml〜200ml,100ml〜1000ml,多通道30〜300μl

3)  Reagents: 乙腈,正己烷。

5. 样品预处理

指令(在预处理前必须处理以下几点)

1) 只有一次性尖端可用于实验,并且当用于吸收不同的试剂时,必须改变尖端;

2)  在实验之前,每个实验器具必须清洁,如果需要,应避免干扰实验结果的污染。

样品预处理前的溶液制备:

1) 样品提取物溶液

6 parts Acetonitrile + 1 parts Extractant 获得准备使用 样品提取物溶液。

2)  SampleredAsolving解决方案

Use 1 part of 集中重新溶解的解决方案 (5倍)并溶解4 parts of deionized 水以获得准备使用样品重新溶解的解决方案。

样品准备

5.1 准备好的,鸭子 sample

1) Take 3.0±0.05g 将均化的组织样品成50mL离心管;加入6ml样品提取物溶液,摇动3min,在室温下在4000r / min上以上离心(20 - 25℃) for 5 min;

2)将2ml透明的有机相取入干燥的容器中,用氮气或空气吹干50〜60 ℃;

3)首先加入1ml正己烷,然后加入0.5mL样品重新溶解溶液,混合30s,在室温(20-25℃)在4000r / min上以上离心5分钟,丢弃上层N-己烷;

4)取液50μL以测试

稀释因子:0.5


6.  ELISA procedures

6.1Instructions

1.  在使用前将ELISA试剂带到室温(20-25°C)。

2.  Put ELISA reagents 使用后立即返回2-8℃

3.  ELISA再现性 在分析过程中,主要取决于洗涤板的一致性,正确的洗涤板 操作是确定ELISA计划的重点

4.  在所有恒温孵育过程中,避免曝光,用盖膜密封微孔板 

6. 2  操作程序

1.  将测试套件带到室温(20-25℃)至少30分钟,注意每种试剂必须在使用前均匀摇动;

2.  将所需的微孔条放入板框架中。重新密封未使用的微孔板,储存在2-8℃,不冷冻。

3.  溶液制备:稀释15ml with deionized water to 300ml.

4.  编号:根据样品和标准溶液编号微孔;每个样品和标准溶液应重复进行;记录他们的职位。

5.  添加标准/样品:添加50μL样品或 标准解决方案分开 重复孔,然后添加酶缀合物,50μl/孔;然后抗体工作溶液,50μL/孔。通过手动摇动板轻轻混合,用盖膜密封微孔板,孵育AT25 °C for 30 min in the dark.

6.  Wash microplate: 小心地打开盖子膜,将液体从微孔中倒出;加入250μL/孔的稀释洗涤缓冲液,完全洗涤4-5次, 每次15-30秒,然后用吸收纸擦拭并翻转擦干。(使用未使用的矛刺穿泡泡 after dry)

7.  着色:然后加入50μl溶液 每个孔中50μlb溶液。通过手动摇晃板,轻轻混合,And incubate ab °C for 15minin the 暗成着色。

8.  测定:将50μl止动溶液加入每个孔中。通过手动摇动板轻轻混合。将微孔板读取器的波长设置为450nm以确定每孔的OD值。 (建议在双波长450 / 630nm处读取OD值 within 5 min).


7. Result judgment

有两种方法来判断结果;第一个是粗略的判断力,而第二个是定量确定。注意,样品的OD值与amantadine具有负相关性 in the sample

7.1  定性决定

可以获得浓度范围(Ng / ml) by 将平均吸光度值与标准进行比较。 Suppose absorbance value of Sample One is 0.3, Sample Two is 1.0,标准 是:0ppb为2.243; 0.2ppb为2.054; 0.8ppb 1.715; 3.2ppb of 1.074; 12.8ppb of 0.451; 51.2ppb为0.155。然后是样品的浓度 one is 在12.8ppb〜51.2ppb的范围内;样品二是3.2ppb〜12.8ppb。氨胺浓度范围 在样品中,可以通过乘以相应的样品稀释来获得。

7. 2  定量分析

为了计算 样品的浓度,应制作标准曲线。前 标准曲线是制造的,概念吸光度% should be know.

Calculation of % absorbance:

吸光度值的百分比=

B

×100%

B0

B-样品的平均OD值或标准解决方案

B0- 0 NG / ML标准溶液的平均OD值

因此,零标准等于100%,吸光度值是 引用百分比。为标准计算的值输入了 对amantadine的半因素图纸纸上的坐标系统 浓度[ng / ml]。 The Amantadine 对应于吸光度的Ng / ml(ppb)中的浓度 可以从校准曲线读取每个样品。

A special software ELISA的结果分析将会 facilitate double or 多个测定。如果您需要,请致电请求。


8.  Precautions

1.  房间温度低于25 ℃ 或试剂的温度和未返回室温(20-25℃)的样品将导致较低的标准OD值。

2.  洗涤过程中微孔板的干燥将伴随着包括非线性标准曲线的情况和不希望的再现性;所以洗完后继续下一步。

3.  Mix evenly 在添加任何试剂之前。

4.  静止溶液是2M硫酸溶液,避免与皮肤接触。

5.  请勿使用超出其到期日的套件。使用来自试剂盒的稀释剂或掺杂试剂将导致灵敏度的变化和检测到的OD值。不要将试剂从不同批号的套件交换使用。

6.  存储:在2-8储存 ℃,不冷冻。将未使用的微孔板放入自动密封袋中以重新密封。标准物质和无色彩色成形器是光敏感的,因此它们不能直接暴露在光线上。

7.  用任何指示该溶液退化的颜色丢弃着色溶液。检测值(450/630nm) 0标准溶液(0 ppb)小于0.5((a450nm<0.5)) 表示其变性。

8. 最佳反应温度为25℃,温度过高或过低会导致检测灵敏度和OD值的变化。


9. 存储和到期日

存储:在2-8储存 ℃, not frozen.

Expiry date: 12个月;生产日期在框中。

注意:如果微孔板的真空包装有泄漏,则使用仍然有效,不影响测试结果,放松使用。

联系我们
公司:深圳市Lvshiyuan生物科技有限公司
Email: [email protected]
DAPENELING,Dapeng,Shenzhen,中国滨海路2号国家生物工业园区大厦 Zip code: 518120
Copyright © 2015-2021
微信
联系我们关闭

公司: 深圳市洛希源生物科技有限公司

微信/ Whatsapp:+ 86-13427908554

移动:+ 86-18165709090 Skype:Bellazou3

电子邮件: [email protected], [email protected]

扫描代码关闭